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腺苷检测

腺苷检测 AMP、ADP、ATP、ADA、SAM

测试范围

腺苷是由腺嘌呤和核糖组成的核苷,腺嘌呤提供碱性基团,参与遗传信息传递。化学式为C10H13N5O4,易溶于水,难溶于乙醇和乙醚。D-核糖是骨架结构,形成核苷的基本信息。腺苷有一磷酸腺苷(AMP)、二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)等。

腺苷是由腺嘌呤和D-核糖通过β糖苷键连接起来的有机化合物,其中碱基部分为腺嘌呤或腺嘌呤衍生物,糖基部分为D-核糖(五碳糖)。腺苷的衍生物包括核苷酸(如腺苷酸AMP)和核酸等。含腺苷比较多的物质,主要有水果类(如大枣、山楂)、中药材(如黄芪、人参)、肉类(如羊肉、牛肉)、食用菌(如香菇、灵芝)、动物组织类(猪心、脑组织、鸡蛋)、茶叶(如发酵茶)等。

腺嘌呤碱基是一种含氮杂环有机物,通过9位氮原子和核糖连接,参与传递遗传信息。五碳糖是以环状结构(呋喃糖)为骨架,通过β-N9-糖苷键和腺嘌呤结合。腺苷的核糖部分能够磷酸化形成腺苷酸(AMP),参与能量代谢。腺苷易溶于水,稳定性受到pH值和温度影响。

检测方法:

1.高效液相色谱(HPLC)

样品用研磨机充分粉碎并搅拌均匀,精确称取约0.1g(精确到0.0001g)混匀试样于15mL 离心管,加入 6mL 10% 甲醇溶液,放置振荡器充分振荡混匀1min,重复超声2次,每次30min,结束后,4000r/min离心10min,取上清液过0.45μm 滤膜,待液相色谱测定。

测试条件:

检测器:DAD   C18色谱柱:250*4.6mm;5μm    

柱温:40℃    波长:260nm    流速:1ml/min   进样量:20μL

标准曲线,定量计算。

腺苷色谱图.jpg

2.超高液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)

精确移取混匀全血样本0.05mL于2mL白色离心管。加入0.1mL质谱级乙腈,涡旋振荡1min。4度12000r/min离心25min。转移上清液用水稀释2倍,过滤膜待上机。

QC同样品处理方法一致。全程在湿冰上进行处理。

超高液相色谱仪:Waters  UPLC 

串联四级杆质谱 :AB SCIEX 4000 MS/MS

色谱柱:Waters BEH Amide  2.1*100mm 1.7μm

UPLC-MSMS方法:

色谱分离条件:

柱温:40 °C,流速:0.3mL/min

进样盘温度:10度

流动相组成:A-0.1%甲酸水     B-乙腈

洗脱程序:梯度洗脱

MSMS条件:

气帘气:35 psi

碰撞气:7psi

离子喷雾电压:+5500、-4500

离子模式: ESI±离子模式

离子源温度:450 °C

离子对参考。

腺苷质谱图.jpg

腺苷衍生物分类

AMP、ADP、ATP、ADA、SAM

检测方法:高效液相色谱(HPLC),一般包括前处理,色谱峰(标品+样品),标准曲线(6个点,1≥r2>0.999,RSD≤2%),含量计算等

C18的色谱柱,250mmx4.6mm,5um;甲醇和磷酸盐(pH=6.5)(10:1)为流动相,等度洗脱。柱温30℃,紫外检测器(UV),260nm。流速为1.0mL/min,进样量10uL。


核苷酸HPLC检测.jpg

如果样本含量比较低,或液相色谱的灵敏度不够,可推荐用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)。

相关测试指标:

dAMP,dGMP,dCMP,dTMP,CMP,FAD,CoA,UMP,IMP,GMP,AMP,ATP,ADP,XMP,GTP,GDP等。

送样要求:

动植物组织一般0.5g,细胞10^7,液体300uL等。


特色服务

1.检测项目和范围比较全面的,2000+个检测项目,自有上万种化合物库,有案例可参考。

2.签订测试合同后先测试,可提交测试结果满意后再付款。

3.送检金额单次超过3000元,干冰送货上门和样本包邮费。

4.如果测试有问题(客户提供双方认可的证明材料),可免费重测一次。

5.技术经验丰富,沟通流畅。

6.价格实惠、透明、无隐形收费。

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