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总皂苷检测

总皂苷检测

测试范围

测定意义:

皂苷(Saponin)是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷,主要分布于陆地高等植物中,也少量存在于海星和海参等海洋生物中。 许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷还具有抗菌的活性或解热、镇静、抗癌等有价值的生物活性。

测定原理:

使用超声波提取样品中的皂苷,利用香草醛-高氯酸显色体系测定总皂苷含量。

所需的仪器和用品:

酶标仪、烘箱、水浴锅、可调式移液器、96孔板、高氯酸、乙酸、超声波清洗器

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100ml×1瓶,4℃保存;

试剂一:24ml×1瓶,4℃保存;

试剂二:高氯酸,自备;

试剂三:乙酸,自备。

总皂苷提取:

样本烘干,粉碎过筛,称取0.05g,加入1mL提取液,超声提取1h;8000g,25℃离心10min,取上清待测。

测定步骤

1、酶标仪预热30min以上,调节波长至589nm。

2、测定管:取0.5mL上清,70℃挥发至干。加入0.2mL试剂一和0.8mL试剂二,55℃水浴20min。吸取40μL加入96孔板中,再加入200μL试剂三,充分混匀后,589nm下测定吸光度A1。

3、空白管:取0.5mL提取液,70℃挥发至干。加入0.2mL试剂一和0.8mL试剂二,55℃水浴20min。吸取40μL加入96孔板中,再加入200μL试剂三,充分混匀后,589nm下测定吸光度A2。计算△A= A1-A2。

总皂苷含量计算:

1.以齐墩果酸为对照品计算

标准状态下的回归曲线为:y = 0.0036x - 0.012,R2 = 0.9968,x为对照品浓度,μg/mL,y为吸光度△A。

总皂苷含量(μg/g干重)=(△A+0.012)÷ 0.0036×V样÷(V样÷V样总×W)

                        =277.78×(△A+0.012)÷W

2.以薯蓣皂苷元为对照品计算

标准状态下的回归曲线为:y = 1.0233x - 0.0016,R2 = 0.9983,x为对照品浓度,mg/mL,y为吸光度△A。

总皂苷含量(μg/g干重)=(△A+0.0016)÷ 1.0233×V样÷(V样÷V样总×W)×1000

                        =977.23×(△A+0.0016)÷W

V样:加入样本体积,0.5mL;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样本干重,g;1000,毫克到微克的换算系数。


特色服务

1.签订测试合同后先测试,可提交测试结果满意后再付款

2.送检金额单次超过3000元,干冰送货上门和样本包邮费

3.技术经验丰富,沟通流畅

4.价格实惠


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