含有醛基或酮基的糖，在碱性条件下可转变成非常活泼的烯二醇结构，具有一定的还原性，可被弱氧化剂氧化成相应的糖酸。这类糖称为还原糖。单糖均是还原糖，双糖中的乳糖、麦芽糖也具有还原性。还原糖常用的测定方法有直接滴定法、高锰酸钾滴定法和比色法。
斐林试剂法
原理：斐林试剂（含硫酸铜与酒石酸钾钠的碱性溶液）在沸水浴中与还原糖反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。
步骤：将斐林试剂甲液（CuSO₄）与乙液（NaOH+酒石酸钾钠）等量混合后，加入待测样品，水浴加热观察颜色变化。在加热条件下，以次甲基蓝为指示剂，以已除去蛋白质的被测样品溶液，直接滴定已标定过的费林氏液，样品中的还原糖与斐林试剂中的酒石酸钾钠铜络合物反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜再与试剂中的亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，到达终点时，稍过量的还原糖立即将次甲基蓝还原，使蓝色褪色，呈现出原样品溶液的颜色，即为终点。根据样品消耗体积，计算还原糖量。
适用性：常用于葡萄糖、果糖等单糖的定性或半定量检测，需在高温条件下进行。
DNS法（3,5-二硝基水杨酸法）
原理：还原糖在碱性条件下将DNS试剂中的硝基还原为氨基，生成棕红色化合物，颜色深浅与还原糖浓度成正比。
步骤：样品与DNS试剂混合后沸水浴加热，冷却后测定溶液在540 nm处的吸光度，通过标准曲线计算浓度。
适用性：适用于酶活测定（如淀粉酶活性）或大批量样品的定量分析。
班氏试剂法
原理：班氏试剂（含柠檬酸钠、碳酸钠和硫酸铜）与还原糖反应，生成Cu₂O沉淀，颜色由蓝→绿→黄→砖红渐变。
步骤：试剂与样品混合后直接沸水浴加热，观察颜色变化。
适用性：可用于尿液葡萄糖检测，操作简便且无需提前配制混合试剂。