欢迎您走进上海美爱达检测技术有限公司

总多糖检测

总多糖检测

测试范围

多糖是生物体中广泛存在的物质,是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,它是生物体内重要的生物大分子,是维持生命活动正常运转的基本物质之一。一般是利用苯酚-硫酸法测定总多糖含量。

《中国药典》推荐方法

苯酚-硫酸法

原理:多糖水解后与苯酚生成橙黄色化合物,490nm比色测定。

特点:操作简便,但需以葡萄糖为标准品,存在换算误差。

碱性酒石酸铜滴定法

原理:多糖酸解为还原糖后滴定,结果乘以换算系数0.9。

适用场景:多糖含量>1%的样品,精度较高。

也可以按照国家推荐标准或相关行业标准测定含量

生化试剂盒法测定

试剂一:12mL× 1 瓶,4℃保存。

试剂二:无水乙醇, 自备。

试剂三:浓硫酸, 自备。

标准品:粉剂 10mg×1 支,4℃避光保存。

自备仪器和用品:

分析天平、分光光度计、台式离心机、可调式移液器、比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴 锅。

操作步骤:

一、总多糖提取

样本烘干粉碎,称取约 0.05g 样本,加入 1mL 水,充分匀浆。100℃水浴提取 2h(必须盖紧 盖子防止水分流失),冷却后 10000g 离心 10min ,取上清。吸取 0.2mL 上清,慢慢加入 0.8mL 无 水乙醇,混匀后 4℃静置过夜,10000g 离心 10min ,弃上清,沉淀中加入 1mL  水,充分混匀溶解 沉淀。

二、测定步骤

1 、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 490nm。

2 、称 1mg 标准 品用 1mL  蒸馏水溶解 ,浓度为 1mg/mL 。取适 当溶液配制浓度为 1mg/mL 、 0.5mg/mL 、0.25mg/mL 、0. 125mg/mL 、0.0625mg/mL 的标准品(蒸馏水进行稀释)。取 1.5mL EP 管 吸取 200µL 标准品,加入 100µL 试剂一和 0.5mL 浓硫酸,混匀后 90℃水浴 20min ,流水冷却。取 750µL 加入比色皿,于 490nm 下测定吸光值A 。根据吸光度(x )和浓度(y ,mg/mL) 做出标准曲 线。

3 、吸取 200µL 上清,加入 100µL 试剂一和 0.5mL 浓硫酸,混匀后 90℃水浴 20min ,流水冷却。 取 750µL 加入比色皿,于 490nm 下测定吸光值 △A。

三、总多糖含量计算

根据标准曲线,将样品△A 带入公式中(x ),计算出样品浓度 y(mg/mL)。 (1) 按样本鲜重计算

总多糖(mg /g 干重)=5y÷W

V 样总:上清液总体积,mL;V 样:加入反应体系中上清液体积,20μL=0.02 mL;W:样品质量,g  ;样本体积已被稀释五倍,T。

注意事项:

1.    如果样品吸光值A 大于 最大浓度标准品吸光值,需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中再乘以相应 稀释倍数。

2.    由于浓硫酸具有强腐蚀性,请谨慎操作


特色服务

1.签订测试合同后先测试,可提交测试结果满意后再付款

2.送检金额单次超过3000元,干冰送货上门和样本包邮费

3.技术经验丰富,沟通流畅

4.价格实惠


联系我们

  • 服务热线: 15026951683
  • 售后投诉:16601999483
  • 企业邮箱:604289886@qq.com
  • 企业QQ: 604289886微信
  • 企业地址: 上海市浦东新区港澳路271号1号楼2层
  • 客服小助手

© 2025 上海美爱达检测技术有限公司  All Rights Reserved.   备案号:沪ICP备2025137874号-1 腾云建站仅向商家提供技术服务